細胞培養中常見的生物污染類型有7種，分別是細菌污染、支原體污染、原蟲污染、黑膠蟲污染、真菌污染、病毒污染以及非細胞污染，那么他們污染細胞的特點分別是什么呢？怎樣能夠減少污染現象的發生？

1-細菌

    細菌污染常見的有大腸桿菌，葡萄球菌等。細菌污染較易發現，在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，培養液一般會在短時間內變黃，有時靜置的培養液不混，稍加震蕩會有很多混濁物漂起。顯微鏡下可見培養液中有大量圓球狀顆粒物漂浮，有時在細胞表面及周圍有大量細菌存在，細胞停止生長并有中毒表現。

處理：①在培養液中加入相應的抗生素，能夠預防絕大多數的細菌污染。

2-真菌

   真菌污染是細胞培養過程中最常見的一種，尤其梅雨季節快要到了，進行細胞培養時更易污染。污染細胞的多為煙曲霉、黑曲霉、毛霉菌、孢子霉、白念珠菌、酵母菌等。霉菌污染后多數在培養液中形成白色或淺黃色漂浮物。一般肉眼可見，較易被發現，短期內培養液多不混濁，倒置顯微鏡下可見于細胞之間縱橫交錯穿行的絲狀、管狀、及樹枝狀菌絲，并懸浮飄蕩在培養液中。

很多菌絲在高倍鏡可見到有鏈狀排列的菌珠；念珠菌或酵母菌形態呈卵形，散在細胞周邊和細胞之間生長。鏡下看時，要將培養瓶用酒精棉球擦干凈，以防止與瓶外尤其瓶底外面生長的菌絲相混淆。

真菌污染后，細胞生長變慢，但最后由于營養耗盡及毒性作用而使細胞脫落死亡。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發現，但是一旦發現有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。

3-支原體

    支原體的大小介于細菌和病毒之間，是一種獨立生活的微生物。對熱敏感，對一般抗生素不敏感。支原體的形態多變，多吸附在細胞表面和細胞之間。電鏡下觀察，中心有高密度的密集顆粒，橫斷面與細胞微絨毛相似。

因國內的血清大多數都沒有做支原體陰性檢測，而支原體又是牛血清中最常見的微生物之一。支原體污染細胞后，培養液輕微發生混濁．但細胞變化不顯著，隨著細胞的培養會慢慢死亡。

支原體污染檢測（熒光染色法）：DNA和與DNA特異性結合的熒光染料結合，使得支原體的DNA著色，然后用熒光顯微鏡觀察。鏡下支原體為散在于細胞同圍或附于細胞膜表面的亮綠色小點。

解決：

1）抗生素排除法：支原體污染預防比解決好。如果不小心污染后，可加入高濃度抗生素（常規使用的5倍濃度）作用24-48小時，再換入常規培養液，但該法不保證有效。推薦用量：慶大霉素 200μg/ml ,四環素10μg/ml ，卡那霉素50μg/ml 。

2）加溫除菌：支原體不耐熱，可以對支原體污染的細胞熱處理除菌。因高溫對細胞本身也會產生一定影響，故熱處理前需先進行預實驗，確定對細胞影響最小而能最大程度的殺死支原體的時間。

4-黑膠蟲

    黑膠蟲的存在目前尚有爭議，其在低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養液也是不渾的，對細胞生長狀態不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。

5-原蟲

    培養液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養。這種共生是非常普遍的，但他們的數量小，細胞站優勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環。

6-病毒

    組織細胞培養過程中，如果沒有除去潛在的病毒，就會產生病毒污染。目前，從原代猴腎細胞的培養中已發現不少于20種血清性病毒。 盡管病毒污染的細胞不影響原代培養，但生產疫苗是不安全的。因此，潛在病毒是細胞大量生產和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。

7-非同種細胞污染

    即細胞交叉污染，由于細胞培養操作時各細胞株所需的器材和溶液沒有嚴格分開，往往會使一種細胞被另一種細胞污染。目前，世界上已有幾十種細胞都被HeLa細胞所污染，致使許多實驗宣告無效。非細胞培養物所造成的化學成分的污染也偶有發生，大多是由于細胞培養所需物品清洗消毒不徹底而帶入一些有毒化學物質所致。

污染是細胞培養的大敵，預防和避免污染是成功培養細胞的關鍵之一。危機意識要貫徹實驗的始終，否則不僅浪費時間，而且浪費人力、物力，甚至造成無法彌補